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抗原抗體檢測方法知多少
發(fā)布日期:2022/12/6 11:10:49
1、抗原抗體的認識
抗原(antigen,Ag)是指能與T細胞、B細胞抗原受體或抗體特異性結合,具有啟動免疫應答潛能的物質??乖肿颖砻婢哂刑厥饬Ⅲw構型和免疫活性的化學基團或區(qū)域稱為抗原決定簇,又稱抗原表位(Epitope)。機體的免疫應答針對的是抗原表位,它們也是與抗體相結合的部位,我們又稱為抗原表位。

抗體(Ig)是由抗原刺激機體免疫系統(tǒng)后產生,并能與相應抗原發(fā)生特異性結合的物質??贵w具有空間結構,也具有抗原決定簇,還可被其他蛋白(如二抗)結合。

 2、抗原抗體的一些蛋白質性質

抗原和抗體均屬于蛋白質;

蛋白質之間存在相互作用,抗原和抗體的結合本質上屬于蛋白質的相互作用;

所有的蛋白都具有空間結構;

任何蛋白質均是一種抗原,抗原和抗體是相對的概念。

〖 ELISA(酶聯免疫吸附實驗) 〗

1、ELISA(酶聯免疫吸附實驗)的介紹 

ELISA是在免疫酶技術的基礎上發(fā)展起來的,它將抗原抗體的結合反應與酶反應的敏感性相結合,在抗原抗體結合的過程中通過在抗原或抗體上標記酶,酶和底物的結合使反應液吸光值發(fā)生改變,吸光值可被機器識別,機器將吸光值的變化經公式轉化為數字信號,ELISA被廣泛應用在液體樣本中的病原、抗體、激素等有機物質的測定中。

2、ELISA的分類

3、ELISA的原理

它采用抗原與抗體的特異反應將待測物與酶連接,然后通過酶與底物產生顏色反應,用于定量測定。測定的對象可以是抗體也可以是抗原。

在這種測定方法中有3種必要的試劑:

①固相的抗原或抗體(免疫吸附劑) 

②酶標記的抗原或抗體(標記物)

③酶作用的底物(顯色劑)

利用ELISA測量時,抗原(抗體)先結合在固相載體上,免疫活性保留,加入一種抗體(抗原)與酶結合成的偶聯物(標記物),此偶聯物也保留其原免疫活性與酶活性,當二者反應結合后,被酶催化水解或氧化還原而呈顏色。其所生成的顏色深淺與欲測的抗原(抗體)含量成正比。 生成產物可用肉眼、光學顯微鏡觀察,也可以用分光光度計(酶標儀)加以測定,簡單迅速,特異性強。

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