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目前免疫測(cè)定可能是臨床實(shí)驗(yàn)室應(yīng)用最普遍的技術(shù)了,而酶聯(lián)免疫測(cè)定因其穩(wěn)定性、方便性、成本低等多項(xiàng)優(yōu)勢(shì)一直在臨床實(shí)驗(yàn)室中占據(jù)著重要的地位。免疫檢測(cè)發(fā)展的前期基本上都只用于定性檢測(cè),很少用于定量檢測(cè),但隨著醫(yī)療技術(shù)的發(fā)展,不少項(xiàng)目的免疫測(cè)定進(jìn)入了定量領(lǐng)域。經(jīng)常有些人會(huì)問(wèn)到,酶免可以做定量檢測(cè)嗎?答案當(dāng)然是肯定的。
肝炎標(biāo)志物檢測(cè)是國(guó)內(nèi)ELISA技術(shù)用得最多的檢驗(yàn)項(xiàng)目。在判斷檢測(cè)結(jié)果時(shí),以顯色在酶標(biāo)比色計(jì)上的比色讀數(shù)是否超過(guò)判斷限(臨界值)為依據(jù),作出報(bào)告陽(yáng)性或陰性的結(jié)論。這是定性的結(jié)果。
隨著免疫技術(shù)的發(fā)展,越來(lái)越多的單克隆抗體的應(yīng)用,各種表面的微孔板、紙片、CAP、標(biāo)記酶、標(biāo)記技術(shù)和酶底物的發(fā)展等,現(xiàn)在似乎什么蛋白、多少含量都可以用ELISA方法作檢測(cè)。特別如腫瘤標(biāo)志物的測(cè)定,許多年前就已經(jīng)有ELISA方法的試劑盒和相應(yīng)儀器供實(shí)驗(yàn)室使用。臨床實(shí)踐說(shuō)明,對(duì)于治療后的腫瘤病人做腫瘤標(biāo)志物的測(cè)定是很重要的,因?yàn)槟[瘤標(biāo)志物的動(dòng)態(tài)變化是指示腫瘤是否復(fù)發(fā)的靈敏指標(biāo)。
我們知道ELISA試驗(yàn)可以手工或利用半自動(dòng)設(shè)備(如洗板機(jī)、酶標(biāo)儀等)進(jìn)行操作,在免疫技術(shù)發(fā)展的初期,手工試驗(yàn)做定性試驗(yàn),得出陰陽(yáng)性結(jié)果,問(wèn)題不大,準(zhǔn)確率是非常高的。但是,現(xiàn)在越來(lái)越多的ELISA試劑盒開(kāi)始用于定量檢測(cè),和全自動(dòng)儀器實(shí)驗(yàn)結(jié)果相比,由于ELISA步驟繁多,只要手工操作中有任何一點(diǎn)疏忽,賴以確定定量結(jié)果的標(biāo)準(zhǔn)曲線都將畫(huà)不好,使檢驗(yàn)結(jié)果的可靠性大受影響。即使有洗板機(jī)也無(wú)法克服。
ELISA免疫試驗(yàn)的結(jié)果受多種因素影響,試劑盒的品質(zhì)為主要影響因素,其次為試劑盒的使用狀況,在操作過(guò)程直接影響試劑盒檢測(cè)水平的發(fā)揮。因此,在完全按照試劑盒操作要求的前提下,均一、穩(wěn)定、標(biāo)準(zhǔn)的操作過(guò)程和實(shí)驗(yàn)條件是獲得最佳實(shí)驗(yàn)結(jié)果的必要條件,只有這樣才能做到既有充分的靈敏性又有很好的重復(fù)性。全自動(dòng)儀器的程序化操作避免了手工操作的局限性,消除了人為誤差,提高了結(jié)果的精確度、準(zhǔn)確度,增加了結(jié)果的可比性,特別是有利于弱陽(yáng)性標(biāo)本的檢出。
綜上所述,說(shuō)明實(shí)現(xiàn)ELISA定量測(cè)定的重要環(huán)節(jié)是需要自動(dòng)化,全自動(dòng)酶免工作站可以完全替代手工操作,可全自動(dòng)完成ELISA試驗(yàn),包括稀釋、樣本分配、試劑分配、孵育、洗板、酶標(biāo)判讀、結(jié)果打印等全步驟,極大地提高了檢測(cè)結(jié)果的可靠性,而且操作簡(jiǎn)單,日常維護(hù)保養(yǎng)方便,無(wú)需值守。全自動(dòng)酶免分析系統(tǒng)已成為國(guó)內(nèi)外檢驗(yàn)科廣泛用于臨床需要免疫檢測(cè)的主導(dǎo)和基礎(chǔ)裝備。
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